Đề tài Nuôi cấy túi phấn lúa

BÁO CÁO MÔN HỌCNUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬTCHỦ ĐỀ: NUÔI CẤY TÚI PHẤN LÚAGiáo viên giảng dạy:TS. Nguyễn Thị PhaSinh viên thực hiện:Hà Thị Đính 1100288Trương Chí Anh B1303637Hoàng Thị Quế Châu B1303642Đỗ Thị Trà My B1303684Lê Triều Anh Thư B13037331NỘI DUNG BÁO CÁOSơ lược về nuôi cấy túi phấnĐặt vấn đềVật liệu và phương pháp nghiên cứuKết quả và thảo luậnKết luậnTài liệu tham khảo2Sơ lược về nuôi cấy túi phấnNuôi cấy túi phấn là sự nuôi cấy các túi phấn có chứa những tiểu bào tử phấn hoa còn non.Phương pháp này thường được sử dụng để thu những cây đơn bội bởi sự hình thành các phôi soma trực tiếp từ phấn hoa hoặc cơ quan mô sẹo.32. Đặt vấn đềPhương pháp này tạo ra nhiều giống mới, rút ngắn thời gian chọn giống.Tuy nhiên, tỷ lệ tạo mô sẹo và cây tái sinh còn thấp, đặc biệt tỷ lệ cây bạch tạng tạo ra cao.Mục đích: tìm hiểu ảnh hưởng của môi trường và một số yếu tố tác động đến hiệu quả nuôi cấy bao phấn giống lúa Indica.43. Vật liệu và phương phápVật liệu: các tổ hợp lúa lai F1:MT508-1/IRBB5 (F1.5) MT508-1/IRBB7 (F1.7)MT508-1/IRBB62 (F1.62)53. Vật liệu và phương phápPhương pháp:Môi trường nuôi cấy: N6 và MSĐặc điểm nuôi cấy:Tạo mô sẹo trong tốiTái sinh cây xanh ở điều kiện chiếu sáng 4000 – 5000 luxThời gian chiếu sáng: 13 – 14h/ngàyNhiệt độ phòng chiếu sáng: 22 – 24oCĐộ ẩm: 50 – 70%63. Vật liệu và phương phápĐánh giá hiệu quả nuôi cấy bao phấn lúa thông qua: Tỷ lệ tạo mô sẹo (%)Tỷ lệ cây tái sinh (%)Tỷ lệ cây bạch tạng (%)73. Vật liệu và phương phápBố trí thí nghiệm (mỗi thí nghiệm lặp lại 3 lần):Thí nghiệm 1: tạo mô sẹo và tái sinh cây đều sử dụng 4 loại môi trường cơ bản: MS, N6, M-019, SK-I.Thí nghiệm 2: tạo 12 môi trường từ 2 nguồn carbon (maltose và sucrose) và 3 nồng độ agar8Bảng 1: 12 môi trường3. Vật liệu và phương phápMôi trường1 23456789101112Nồng độ Agar (%)0,50,7510,50,7510,50,7510,50,751Nguồn CarbonSucrose 60g/lMaltose 60g/lSucrose 80g/lMaltose 80g/l93. Vật liệu và phương phápThí nghiệm 3: khảo sát sự phát triển mô sẹo qua 5 mốc thời gian:T0: 1 ngàyT1: 5 ngàyT2: 10 ngàyT3: 15 ngàyT4: 20 ngàyKết thúc mỗi mốc thời gian thì chuyển mô sẹo sang môi trường tái sinh.104. Kết quả và thảo luậnẢnh hưởng của các môi trường khác nhau lên khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây.=> Môi trường tối ưu đối với tạo mô sẹo là N6 và SK-I, đối với cây tái sinh là MS và M-019.11Tạo mô sẹo (%)Cây tái sinh (%)Môi trườngF1.5F1.7F.62TrungbìnhF1.5F1.7F.62Trung bìnhMS1.60.81.31.240.341.236.139.2N64.25.34.74.77.48.18.68.0M-0191.31.80.91.335.539.240.835.8SK-I5.75.25.15.311.55.07.97.94. Kết quả và thảo luậnẢnh hưởng của nguồn carbon và nồng độ agar đến tỷ lệ tạo mô sẹo:=> Điều kiện tối ưu để tạo mô sẹo: nguồn C là sucrose hoặc maltose (60g/l) và nồng độ agar là 0.75%.12Trung bình tỷ lệ tạo mô sẹo (%)Nồng độ agar(%)Sucrose (g/l)Maltose (g/l)608060800.53.51.54.24.10.754.22.24.63.513.42.13.93.44. Kết quả và thảo luậnẢnh hưởng bởi thời gian cấy chuyển mô sẹo sang môi trường tái sinh cây đến tỷ lệ hình thành bạch tạng trong nuôi cấy bao phấn lúa Indica.Tỷ lệ cây bạch tạng xuất hiện tăng dần theo thời gian lưu trữ mô sẹo trong môi trường tạo mô.Thời gian thích hợp để chuyển mô sẹo sang môi trường tái sinh là từ 1 tuần đến 10 ngày => Tỷ lệ cây xanh cao nhất, cây bạch tạng thấp.134. Kết quả và thảo luận Cây bạch tạng thu được trong thí nghiệm145. Kết luậnĐiều kiện tối ưu đối với tạo sẹo:Môi trường SK-I và N6Nguồn carbon là maltose hoặc sucrose hàm lượng là 60g/l.Nồng độ agar: 0,75%Điều kiện tối ưu đối với cây tái sinh là môi trường MS và M-019.Thời gian thích hợp để chuyển mô sẹo sang môi trường tái sinh là từ 1 tuần đến 10 ngày.156. Tài liệu tham khảoNghiên cứu ảnh hưởng của môi trường và một số yếu tố tác động đến hiệu quả nuôi cấy bao phấn giống lúa Indica – Tạp chí Khoa học và Phát triển 2011: Tập 9, số 5: 751 – 758. Trường ĐH Nông Nghiệp Hà Nội.16