Nghiên cứu chỉ thị phân tử SSR ở một số giống/dòng chè trồng tại Thái Nguyên - Hoàng Thị Thu Yến

Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 93 NGHIÊN CỨU CHỈ THỊ PHÂN TỬ SSR Ở MỘT SỐ GIỐNG/DÒNG CHÈ TRỒNG TẠI THÁI NGUYÊN Hoàng Thị Thu Yến1*, Lê Quang Thƣơng2, Dƣơng Thị Nhung2, Hà Thị Loan2 1Trường Đại học Khoa học – ĐH Thái Nguyên 2Trường Trung học Phổ thông chuyên Tuyên Quang TÓM TẮT PCR-SSR là kỹ thuật sinh học phân tử quan trọng, đƣợc sử dụng phổ biến và hiệu quả để nghiên cứu chỉ thị phân tử trong c đánh giá sự đa dạng genome các giống/dòng chè thu thập tại xã Tân Cƣơng, thành phố Thái Nguyên, tỉnh Thải Nguyên; Công ty chè Sông Cầu và xã Trại Cài – huyện Đồng Hỷ tỉnh Thái Nguyên. DNA tổng số từ các mẫu nghiên cứu đƣợc sử dụng làm khuôn để thực hiện kỹ thuật PCR- SSR với 5 cặp mồi đặc hiệu. Kết quả khuếch đại ở mỗi mồi đều chỉ ra sự đa dạng trình tự lặp lại của đoạn SSR và đa dạng các phân đoạn DNA đƣợc khuếch đại. Sử dụng phần mền NTSYS version 2.1 phân tích sự đa dạng các phân đoạn DNA đƣợc khuếch đại bằng kỹ thuật PCR-SSR, các giống/dòng chè nghiên cứu đƣợc chia thành 2 nhóm chính: Nhóm I gồm 22 mẫu chè, chia thành 2 nhóm phụ. Nhóm phụ 1 gồm 19 mẫu (M1, M2, M17, M7, M10, M20, M22, M23, M11, M21, M4, M8, M16, M15, M3, M14, M5, M6, M13), hệ số sai khác giữa chúng với nhóm phụ còn lại là 0,412. Nhóm phụ 2 gồm 3 mẫu M12, M24 và M25 có hệ số sai khác là 0,252. Nhóm chính II gồm 3 mẫu là M9, M18, M19, ba mẫu này có hệ số di truyền sai khác lớn nhất so với nhóm khác là 0,46. Từ khóa: Cây chè, Camellia sinensis, đa dạng di truyền, quan hệ di truyền, SSR, microsatellite, PCR-SSR MỞ ĐẦU* Chè là thứ nƣớc uống tự nhiên lâu đời nhất, đƣợc tiêu thụ rộng rãi với chi phí thấp, đƣợc trồng chủ yếu ở các nƣớc nhiệt đới của Châu Á (Ấn Độ, SriLanka, Trung Quốc, Indonesia, Việt Nam..), Châu Phi (Kenya, Uganda, Malawi..) và Châu Mĩ la tinh (Argentina). Camellia sinensis (Camellia ( (Angiospermae) [11] (Camellia sinensis - (Camellia assamica - (Camellia assamica lasiocalyx -Campod). Ba loài chè này là nguồn gốc cho hầu hết các loài chè trồng ở các nƣớc trên thế giới hiện nay [19] * Tel: 0982 752153, Email: yenhtt@tnus.edu.vn Camellia sinensis (L) O. Kuntze đƣợc phân chè Camellia sinensis var sinensis, Camellia sinensis var pubilimba, Camellia sinensis var Assamica và Camellia sinensis var dehungensis [11]. Đặc điểm về giống và chu kỳ sống của chè phức tạp tạo nên một số hạn chế cho chọn tạo và cải tiến giống theo phƣơng pháp truyền thống. Việc phân biệt giữa các thứ chè thuộc chè China, Assmam và Compod gặp khó khăn do tính chất không đồng nhất của chè [15]. Hơn nữa, các mô tả về hình thái không phản ánh các biến đổi về mặt di truyền trong cây trồng mà chỉ cho thấy khi mô tả về sinh hóa và sinh lý [17], [18]. Do đó, việc sử dụng các chỉ thị phân tử ở mức độ DNA đƣợc các nhà khoa học quan tâm sử dụng để phát hiện các biến đổi về mặt di truyền. Trên thế giới đã có nhiều nghiên cứu đa dạng cây chè ở mức độ phân tử [7], [8], [16] Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 94 [6], [12], [16] [10] [9], [13], [14]. Trong đó SSR (simgle sequence repeats – SSR) còn đƣợc gọi là DNA vệ tinh (microsatellite) là một đoạn DNA có sự lặp lại của trình tự nulceotide nào đó. Hiện tƣợng tồn tại các SSR trong cơ thể sinh vật nhân chuẩn là khá phổ biến. Tuy nhiên, tùy từng loài mà số lƣợng nucleotide trong mỗi đơn vị lại có thể thay đổi từ một đến hàng trục và số lƣợng đơn vị lặp lại có thể biến động từ 2 đến hàng ngàn lần. Các đoạn lặp lại hai, ba, bốn nucletotide phân bố phổ biến trọng genome của các loài động thực vật. Kỹ thuật PCR khuếch đại đoạn SSR (PCR-SSR) với mồi thiết kế dựa trên trình tự genome của từng loài nên chỉ thị SSR cho kết quả nhanh và cao. Chỉ thị phân tử SSR với nhiều đặc tính nhƣ độ đa dạng cao, phân bố rộng rãi trong genome, di truyền theo quy luật Mendel, biểu hiện đồng hợp trội. Trình tự SSR đƣợc xác định từ trình tự DNA genome và cDNA (EST – Expression Sequence Tag). Chỉ thị SSR có nguồn gốc từ cDNA/EST (EST-SSR) có thể giúp giảm chi phí và thời gian xây dựng chỉ thị do các đoạn cDNA/EST liên quan trực tiếp đến các gen chức năng, nên SSR phát triển từ nguồn dữ liệu này có thể sẽ hữu ích hơn [14]. Năm 2009, nhóm nghiên cứu của Sharma đã thống kế có 2181 đoạn EST từ cơ sở dữ liệu NCBI, trong đó có 1223 gen có trình tự SSR từ 2-34 nucleotide. Trong 109 gen phân tích nghiên cứu có chứa 120 SSR đƣợc xác định [14]. Theo thống kê của Ma và cộng sự (2010), ở chè có 6899 đoạn EST đƣợc công bố trên ngân hàng gen và có thêm 74 chỉ thị SSR-EST mới đƣợc nghiên cứu thực nghiệm [9]. Năm 2012, nhóm tác giả Sahu thống kê đƣợc 12852 đoạn EST ở chè, theo tính toán lý thuyết có 1636 đoạn EST chứa 2371 SSR. Khi so sánh các đoạn EST ở chè với các gen đã biết chức năng từ các loài khác cho thấy hầu hết các chỉ thị SSR-EST đƣợc nghiên cứu cho đến nay liên quan đến các quá trình sinh học, thành phần tế bào và chức năng phân tử ở chè [13]. Ở Việt Nam, việc ứng dụng các kĩ thuật sinh học phân tử vào việc đánh giá hệ gen của cây chè trong chọn tạo giống cây trồng còn là vấn đề mới mẻ. Năm 2004, nhóm tác giả Nguyễn Minh Hùng, Đinh Thị Phòng đã sử dụng kỹ thuật RAPD để nghiên cứu tính đa hình của một số dòng chè đột biến [2] thuật này để phân tích sự đa dạng trình tự genome ở các dòng chè Shan [3] - t [1], [5]. Năm 2009, Trần Đức Trung và đtg đã nghiên cứu đánh giá sự đa dạng di truyền 96 giống/dòng chè trồng ở Việt Nam bằng kỹ thuật PCR- SSR [4]. Với mục đích nhằm tìm kiếm chỉ thị phân tử có tiềm năng ứng dụng trong chọn giống chè, chúng tôi tiến hành phân tích chỉ thị SSR ở một số giống/dòng chè trồng ở các địa phƣơng của tỉnh Thái Nguyên. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP Nguyên liệu Sử dụng lá của một số giống/dòng chè đƣợc thu thập tại xã Tân Cƣơng – thành phố Thái Nguyên, xã Minh Lập và công ty chè Sông Cầu thuộc huyện Đồng Hỷ, tỉnh Thái Nguyên (Bảng 1). Phƣơng pháp Tách chiết DNA tổng số Phƣơng pháp tách chiết DNA tổng số đƣợc thực theo mô tả của Hoàng Thị Thu Yến và đtg [5]. PCR-SSR Dựa trên cơ sở các dữ liệu mồi SSR đã công bố [9], [14] - 2). Phản ứng đƣợc thực hiện trong 12,5 l thể tích với các thành phần: 6,25 l master mix (Qiagen), 0,5 l mồi F (10mM), 0,5 l mồi F (10mM), 1 l DNA (40 ng/ l); 4,25 l H2O. Chu trình nhiệt của phản ứng là: 940C trong 3 phút, (940C trong 1 phút, Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 95 48 0 C trong 45 giây, 72 0C trong 45 giây) lặp lại 32 chu kỳ, 720C trong 10 phút và lƣu giữ ở 4 0C. Sản phẩm PCR-SSR đƣợc bằng điện di trên gel agarose 3% và chụp ảnh bằng Gel Doc (Pharmacia Amersham Biotech). Phân tích số liệu Dựa vào hình ảnh điện di sản phẩm PCR- SSR, sự xuất hiện các băng điện di đƣợc ƣớc lƣợng kích thƣớc dựa vào marker chuẩn và thống kê các băng điện di với từng mồi ở từng mẫu nghiên cứu. Sự xuất hiện hay không xuất hiện các băng điện di đƣợc tập hợp để phân tích số liệu theo nguyên tắc: số 1- xuất hiện phân đoạn DNA và số 0 - không xuất hiện phân đoạn DNA. Các số liệu này đƣợc xử lý trên máy tính theo chƣơng trình NTSYSpc version pc 2.0 (Applied Biostatistics Inc., USA., 1998) để xác định quan hệ di truyền của các dòng chè. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Phân tích chỉ thị SSR ở các mẫu chè nghiên cứu bằng kỹ thuật PCR-SSR Kết quả điện di sản phẩm PCR-SSR của 5 cặp mồi với 25 giống/dòng chè nghiên cứu chỉ ra sự đa dạng trình tự SSR. Kết quả điện di sản phẩm PCR-SSR ở 3 mồi đặc trƣng nhất đƣợc thể hiện trên hình 1, hình 2 và hình 3. Bảng 1: Các mẫu chè nghiên cứu STT Ký hiệu Tên giống Nguồn gốc STT Ký hiệu Tên giống Nguồn gốc 1 M1 Keo Am Tích Công ty chè Sông Cầu 14 M14 LDP2 Công ty chè Sông Cầu 2 M2 Hùng Đỉnh Bạch 15 M15 Keo Am Tích Xã Tân Cƣơng 3 M3 Tri 777 16 M16 Hùng Đỉnh Bạch 4 M4 Shan 17 M17 Kim Tuyên 5 M5 Phúc Vân Tiên 18 M18 LDP2 6 M6 LDP1 19 M19 Tri 777 7 M7 Trung Du 20 M20 Trung Du 8 M8 Yabukita 21 M21 Trung Du Xã Minh Lập 9 M9 Long Vân 22 M22 Kim Tuyên 10 M10 Bát Tiên 23 M23 Bát Tiên 11 M11 Yakatamidozi 24 M24 LDP1 12 M12 Kim Tuyên 25 M25 Tri 777 13 M13 Phú Thọ 10 Bảng 2: Thông tin vể cặp mồi sử dụng trong nghiên cứu TT Tên mồi Trình tự mồi Kích thƣớc dự kiến Motif lặp 1 YS27 F: 5'- GGGGATAGTACAAACACACAAC -3' R: 5'- GCTCCTCTTTCTTCACCACTT - 3' 80 - 110 bp GA 2 YS28 F: 5' - GTCCCCATTGCTCTTAGTTT - 3' R: 5' - GACAATCATTGCCACCACAT- 3' 170-200 bp (TG)(GA ) 3 YTS64 F: 5’ – AGTTGGCTGAATCAGTCCCTT -3’ R: 5’ - GCTTAAATCACAATTCAAAGC -3’ 260 -275 bp TTGTT 11 YS83 F: 5'- GAGGATTTGGGTTTGTGAAC -3' R: 5' - TCATTCTCTCTGGCATCACC -3’ 250 – 600 bp TGG 3 YTS98 F: 5’ – TCACCACCTTCCCTTGATAG - 3’ R: 5’ - GCATTGGCAATATGAACATG - 3’ 230 – 245 bp AAAT Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 96 Hình 1. Hình ảnh điện di sản phẩm PCR-SSR của 25 mẫu chè với mồi YS27 (M: Marker 100bp, 1 - 25: các mẫu nghiên cứu theo thứ tự tại bảng 1) Hình 2. Hình ảnh điện di sản phẩm PCR-SSR của 25 mẫu chè với mồi YS28 (M: Marker 100bp, 1 - 25: các mẫu nghiên cứu theo thứ tự bảng 1) Với mồi YS27, sản phẩm PCR-SSR dự kiến có kích thƣớc khoảng 80-110bp. Kết quả trên hình 1 cho thấy sản phẩm PCR-SSR của 25 giống/dòng chè nghiên cứu có kích thƣớc giống nhƣ tính toán lý thuyết. Tuy nhiên, một số mẫu có 2 băng (6, 7, 8, 10, 11 và 12). Nhƣ vậy, giữa các giống/dòng chè nghiên cứu có sự đa dạng alen và kết quả này phù hợp với công trình nghiên cứu đã công bố [14]. Với mồi YS28, sản phẩm PCR-SSR dự kiến có kích thƣớc khoảng 170-200bp. Kết quả trên hình 2 cho thấy sản phẩm PCR-SSR của 25 giống/dòng chè nghiên cứu có kích thƣớc ƣớc tính khoảng 290 - 320 bp. Kết quả chúng tôi thu đƣợc cho thấy sự sai khác về kích thƣớc đoạn DNA so với kết quả đã đƣợc công bố bởi Sharma và đtg [14]. Nhƣ vậy, giữa các giống/dòng chè nghiên cứu có sự đa dạng về trình tự (TG)(GA) lặp lại. Với mồi YS83, sản phẩm dự kiến có kích thƣớc 250-600bp. Sản phẩm PCR-SSR ở 25 mẫu chè nghiên cứu có kích thƣớc dao động từ 290-320bp. Trong đó, ở kích thƣớc 290 bp chỉ xuất hiện ở mẫu số 9, 18 và 19. Nhƣ vậy mồi YS83 thể hiện tính đa dạng alen không cao khi so sánh với kết quả của Sharma và đtg [14]. Với mồi YTS64, sản phẩm PCR-SSR dự kiến có kích thƣớc khoảng 260-275bp. Kết quả ở hình 3 cho thấy tất cả các mẫu đều có băng khoảng 260-275bp, một số mẫu có thêm các băng phụ khoảng 300bp (mẫu 11, 12 và 13). Nhƣ vậy, kết quả với cặp mồi YTS64 cho thấy sự đa dạng alen giữa các mẫu chè khảo sát. Với mồi YTS98, kích thƣớc sản phẩm PCR-SSR dự kiến khoảng 230-245bp. Tại vị trí khoảng 240bp tất cả các giống/dòng đều xuất hiện băng DNA, hầu hết các mẫu có thêm băng phụ khoảng 600bp. Nhƣ vậy, kết quả với cặp mồi YTS98 cho thấy hầu nhƣ không có sự đa dạng alen giữa các mẫu chè khảo sát. Kết quả PCR-SSR mồi YTS64 và YTS98 của chúng tôi giống với kết quả đã đƣợc công bố năm 2010 bởi Ma và đtg [9]. Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 97 Hình 3. Hình ảnh điện di sản phẩm PCR-SSR của 25 mẫu chè với mồi YS64 (M: Marker 100bp, 1 - 25: Ccác mẫu nghiên cứu theo thứ tự bảng 1) Bảng 3. Số phân đoạn DNA xuất hiện và số phân đoạn DNA đa hình đối với mỗi mồi Mồi Phân đoạn DNA khuếch đại Phân đoạn DNA đa hình Tỷ lệ phần trăm phân đoạn đa hình YS98 3 2 66.67 YS28 4 4 100 YS27 4 4 100 YS64 4 4 100 YS83 3 3 100 Tổng 18 17 93.3 Mối quan hệ di truyền giữa các dòng chè dựa trên phân tích SSR Kết quả điện di sản phẩm PCR-SSR của 25 mẫu chè với 5 cặp mồi thu đƣợc 18 phân đoạn DNA, Mồi YS27, YS28 và YTS64 có 4 phân đoạn DNA đƣợc khuếch đại, mồi YS83 và YTS98 có 3 phân đoạn DNA đƣợc khuếch đại. Nhƣ vậy, sử dụng kỹ thuật PCR-SSR với 5 cặp mồi SSR cho thấy sự khác nhau trong cấu trúc genome của 25 mẫu chè. Tính đa hình đƣợc thể hiện ở sự xuất hiện hay không xuất hiện phân đoạn DNA khi so sánh giữa các mẫu với nhau. Thông qua kết quả phân tích đa dạng sử dụng 5 cặp mồi SSR cho thấy số phân đoạn DNA xuất hiện là khác nhau và thể hiện tính đa hình là khác nhau, số phân đoạn DNA xuất hiện và số phân đoạn DNA đa hình đối với mỗi mồi đƣợc thể hiện ở bảng 3. Kết quả ở bảng 3 cho thấy các phân đoạn đƣợc khuếch đại có kích thƣớc khoảng 80- 600bp. Trong đó các mồi YS28, YS27, YS64, YS83 cho kết quả đa hình cao (100%). Còn mồi YS98 cho kết quả đa hình thấp hơn (66,67%). Dựa trên sự xuất hiện hay không xuất hiện các phân đoạn DNA của các mẫu khi phân tích điện di sản phẩm PCR-SSR, chúng tôi xác định đƣợc hệ số đồng dạng di truyền của các mẫu chè ở cấp độ phân tử. Số liệu đƣợc phân tích theo chƣơng trình NTSYSversion 2.0 (theo quy ƣớc 1= xuất hiện băng, 0 = không xuất hiện băng). Kết quả cho thấy hệ số di truyền dao động từ 0,33 – 1. Trong đó mẫu M1 và M2; mẫu M1 và M17; mẫu M2 và M17; mẫu M20 và M22 có hệ số tƣơng đồng lớn nhất là 1, còn mẫu M4 có hệ số tƣơng đồng nhỏ nhất với mẫu M12 là 0,33. Kết quả phân tích hệ số di truyền giữa các mẫu nghiên cứu đƣợc thể hiện bằng sơ đồ hình cây của 25 mẫu chè ở hình 4. Cụ thể, cây phân loại đƣợc chia thành hai nhóm rõ ràng, hệ số tƣơng đồng giữa hai nhóm là 0,54 (tức 54%). Nhóm I gồm 22 mẫu chè, chia thành 2 nhóm phụ. Nhóm phụ 1 gồm 19 mẫu (M1, M2, M17, M7, M10, M20, M22, M23, M11, M21, M4, M8, M16, M15, M3, M14, M5, M6, M13), hệ số sai khác giữa chúng với nhóm phụ còn lại là 0,412. Nhóm phụ 2 gồm 3 mẫu M12, M24 và M25 có hệ số sai khác là 0,252. Nhóm chính II gồm 3 mẫu là M9, M18, M19, ba mẫu này có hệ số di truyền sai khác lớn nhất so với nhóm khác là 0,46. Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 98 Hình 4. Biểu đồ quan hệ di truyền giữa các dòng chè nghiên cứu (M1 – M25: các mẫu nghiên cứu theo thứ tự bảng 1) KẾT LUẬN Chúng tôi sử dụng kỹ thuật PCR-SSR với 5 cặp mồi đặc hiệu đã chỉ ra sự đa alen các đoạn SSR và quan hệ di truyền của 25 giống/dòng chè nghiên cứu. Lời cảm ơn: Công trình đƣợc thực hiện với kinh phí của đề tài cấp Đại học: “Nghiên cứu sự đa dạng trong hệ gen của một số giống chè đặc sản trồng tại Thái Nguyên bằng kỹ thuật SSR” và trang thiết bị của Phòng thí nghiệm sinh học, khoa Khoa học Sự sống, Trƣờng Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên; Viện Khoa học Sự sống – Đại học Thái Nguyên. TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Bảo Lâm (2011), Tân Cƣơng – Xứng danh đệ nhất danh trà Thái Nguyên. thainguyen.gov.vn. 2. Nguyễn Minh Hùng, Đinh Thị Phòng (2004), "Đánh giá tính đa hình RAPD genome một số giống chè". Tạp chí Công nghệ sinh học, 2(2): 109 -116. 3. Nguyễn Thị Thu Hƣơng, Nguyễn Thị Thu Phƣơng, Hoàng Văn Chung, Hoàng Thị Thu Yến (2010), "Bƣớc đầu nghiên cứu đa dạng di truyền ở một số dòng chè shan (Camellia sinensis var. assamica (Mast) Pierre sec. Phamh) bằng kỹ thuật RAPD". Tạp chí Khoa học và Công nghệ Thái Nguyên, 63(3): 149 -157. 4. Trần Đức Trung (2009), "Nghiên cứu sự đa dạng di truyền các giống/ dòng chè (Camellina sinensis (L.)O. Kuntze) ở Việt Nam bằng chỉ thị hình thái và chỉ thị phân tử microsatellite(SSR)". Luận văn Thạc sĩ, Trƣờng Đại học Bách khoa Hà Nội. 5. Hoàng Thị Thu Yến, Nguyễn Văn Tuấn, Hoàng Thị Ngà (2012), "Nghiên cứu đa dạng di truyền genome một số dòng chè (Camellia sinensis) trồng tại xã Tân Cƣơng – Thành phố Thái Nguyên bằng kỹ thuật RAPD". Tạp chí Khoa học và Công nghệ Thái Nguyên, 96(8): 139 -143. 6. Ji P. Z., Jiang H. B., Huang X. Q., Zhang J., Liang M. Z., Wang P. S. (2009), "Genetic diversity of ancient tea gardens and tableland tea gardens from Yunnan Province as revealed by AFLP marker". Yi chuan, 31(1): 101 - 108. 7. Li J., Jiang C. J., Wang Z. X. (2005), "RAPD analysis on genetic diversity of the preconcentrated core germplasms of Camellia Sinensis in China". Yi chuan, 27(5): 765 - 771. [8]. Lin S. Y., Chen I. Z., Tsai C. M., Chen Y. L. (2005), "Detection of genetic relationship in Taiwan tea variety (Camellia sinensis (L.) O. Kuntze) with RAPD markers". Journal of the Chinese Society for Horticultural Science, 51(4): 357 - 366. 9. Ma J. Q., Zhou Y. H., Ma C. L., Yao M. Z., Jin J. Q., Wang X. C., Chen L. (2010), "Identification and characterization of 74 novel polymorphic EST-SSR markers in the tea plant, Camellia sinensis (Theaceae)". American journal of botany, 97(12): 153 - 156. 10. Matsumoto S., Takeuchi A., Hayatsu M., Kondo S. (1994), "Molecular cloning of phenylalanine ammonia-lyase cDNA and classification of varieties and cultivars of tea plants (Camellia sinensis) using the tea PAL cDNA probe ". Theoretical and applied genetics 89(6): 671-675. 11. Min T., Bartholomew B. (2007), "18 Theaceae". Flora of China 12: 366 - 367. 12. Mishra R. K., Chaudhury S., Ahmad A., Pradhan M., Siddiqi T. O. (2009), "Molecular Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 99 analysis of tea clones (Camellia sinensis) usinh ALFP markers". International Journal of Intergrative Biology, 5(2): 130 - 135. 13. Sahu J., Sarmah R., Dehury B., Sarma K., Sahoo S., Sahu M., Barooah M., Modi M. K., Sen P. (2012), Mining for SSRs and FDMs from expressed sequence tags of Camellia sinensis, www.bioinformation.net. 14. Sharma H., Kumar R., Sharma V., Kumar V., Bhardwaj P., Ahuja P. S., Sharma R. K. (2009), "Identification and cross-species transferability of 112 novel unigene-derived microsatellite markers in tea (Camellia sinensis)". American journal of botany, 98(6): 133 -138. 15. Visser T. (1996), Tea, Camellia sinensis (L.) O. Kuntze In Outline of Perennial Crop Breeding in the Tropics Edited by Ferwarda FP W. F., Veen-man H, Zonen NV. Wageningen, The Netherlands 459-493. 16. Wachira F., Tanaka J., Takeda Y. (2001), "Genetic variation and differentiation in tea (Camellia sinensis) germplasm revealed by RAPD and AFLP variation ". Journal of Horticultural Science Biotechnology 76(5): 557 - 563. 17. wickremasinghe M. R. (1981), "Variation in some leaf charateristics in tea (Camellia sinensis) and their use in identification of clones". Tea, 50: 183-189. 18. Wickremasinghe R. T. (1979), Tea In Advances in food research Volume 24. Edited by Mark EM, Steward GF. New York: 229-286. 19. Wight W. (1959), "Nomenclature and Classification of the Tea Plant". Nature, 183: 1726 - 1728. SUMMARY INVESTIGATION SSR MARKERS IN SOME VARIETIES/CLONES TEA (CAMELLIA SINENSIS) IN THAI NGUYEN Hoang Thi Thu Yen 1* , La Quang Thuong 2 , Duong Thi Nhung 1 , Ha Thi Loan 1 1College of Sciences – TNU, 2Tuyen Quang High School PCR-SSR is important molecular technology which used popular and effective to study molecular markers in breeding, genetic diversity studies, gene mapping, genetic identification In this study, we analyzed the characteristics of the size of some SSR fragments and evaluated genomic diversity of varieties/clones collected in Tan Cuong commune, Thái Nguyen city, Thai Nguyen province, Song Cau tea Company and Minh Cau commune - Dong Hy district, Thai Nguyen province. Total DNA from the samples is used as a template to perform PCR with specific 5-SSR primer pairs. Amplification results of primers are indicated SSR fragments sequence diversity and diversity of the DNA fragments to be amplified. Using NTSYS version 2.1 software to analysis diversity of DNA fragments amplified by PCR - SSR, research varieties/lines tea is divided into two main groups: Group I included 22 tea samples, divided into 2 subgroups. Subrroup 1 consists of 19 samples (M1, M2, M17, M7, M10, M20, M22, M23, M11, M21, M4, M8, M16, M15, M3, M14, M5, M6, M13), coefficient of variation between them with the remaining 0.412. Subgroup 2 consists of three samples M12, M24 and M25 have different coefficient is 0.252. Group II consists of 3 samples M9, M18 and M19, three samples have largest heritability difference was 0.46 compared with other groups. Keywords: Tea, Camellisa sinensis, genetics diversity, genetic relationship, SSR, microsatellite, PCR-SSR Ngày nhận bài:14/4/2014; Ngày phản biện:05/5/2014; Ngày duyệt đăng: 09/6/2014 Phản biện khoa học: TS. Nguyễn Thị Hải Yến – Trường Đại học Khoa học - ĐHTN * Tel: 0982 752153, Email: yenhtt@tnus.edu.vn Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 93 – 99 100 Hàn Thị Thúy Hằng Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 101 – 104 101 XÂY DỰNG DỮ LIỆU ĐỊA CHẤT CÔNG TRÌNH KHU VỰC THÀNH PHỐ THÁI NGUYÊN Hàn Thị Thúy Hằng* Trường Đại học Kỹ thuật Công nghiệp - ĐH Thái Nguyên TÓM TẮT Một trong những vấn đề quan trọng giúp cho việc thiết kế nền móng công trình hợp lý về kinh tế và kỹ thuật đó là dữ liệu địa chất công trình. Trong bài báo này, tác giả trình bày đặc điểm địa chất và dựa vào sự tƣơng đồng cấu trúc của các lớp đất tiến hành phân chia thành 3 kiểu cấu trúc nền đất đặc trƣng cho khu vực thành phố Thái Nguyên. Đồng thời sử dụng phần mềm Arcgis 10.1, phƣơng pháp nội suy Kriging để tìm hiểu quy luật phân bố các kiểu cấu trúc nền và chuyển đổi các số liệu địa chất công trình rời rạc trong không gian thành dữ liệu địa chất công trình dạng lớp liên tục. Tại mỗi vị trí xây dựng trong khu vực đều có thể tìm đƣợc dữ liệu địa chất công trình theo cột địa tầng, tính chất cơ lý của các lớp đất để có đƣợc cái nhìn tổng quát trong việc định hƣớng xây dựng quy hoạch công trình. Từ khóa: địa chất công trình, cấu trúc nền, kriging, địa tầng, dữ liệu lỗ khoan ĐẶT VẤN ĐỀ* Trong những năm gần đây quá trình đô thị hóa ở Thái Nguyên đã diễn ra rất mạnh mẽ đặc biệt là xây dựng công trình cao tầng. Để có đƣợc giải pháp nền móng hiệu quả cho các công trình xây dựng nhà cao tầng, hệ thống hạ tầng ngầm đô thị.. các nhà thiết kế cần có những dữ liệu địa chất công trình đáng tin cậy và đƣợc thu thập từ những phƣơng án khảo sát địa chất công trình (ĐCCT) khác nhau. Dữ liệu ĐCCT đƣợc thành lập giúp cho ngƣời sử dụng lƣu trữ, cập nhật tài liệu lỗ khoan đƣợc thuận lợi, nhanh chóng, lâu dài. Cơ sở dữ liệu sẽ đƣợc khai thác để đánh giá đặc điểm cấu trúc nền đất mang tính tổng thể, phục vụ tốt công tác sử dụng đất, đảm bảo cho sự ổn định các công trình trong môi trƣờng địa chất tự nhiên của khu vực. Do vậy việc xây dựng cơ sở dữ liệu địa chất vùng là rất cần thiết giúp cho các nhà quy hoạch, kỹ sƣ thiết kế và thi công có định hƣớng đúng đắn trong phƣơng án quy hoạch, phƣơng án nền móng hợp lý nhất về kinh tế và kỹ thuật. XÂY DỰNG CƠ SỞ DỮ LIỆU ĐỊA CHẤT CÔNG TRÌNH Phƣơng pháp nghiên cứu: - Thu thập, đánh giá và xử lý dữ liệu nguồn là các trụ hố khoan của các báo cáo ĐCCT đã có trong vùng nghiên cứu. * Tel: 0987 615167, Email: hanthuyhang@gmail.com - Hệ thống hóa các lớp đất, phân tích đặc điểm địa chất, xây dựng và phân chia các kiểu cấu trúc nền. - Xây dựng, quản lý và cập nhật dữ liệu các thuộc tính của hố khoan ĐCCT trên nền MS Excel. - Tích hợp dữ liệu với các bản đồ nền dạng số, sử dụng phần mềm Arcgis 10.1 tiến hành nội suy Kriging diện phân bố và bề dầy các lớp đất từ các lỗ khoan khảo sát có sẵn và quản lý dữ liệu lỗ khoan. Đặc điểm địa hình Địa hình Thành phố Thái Nguyên khá bằng phẳng. Tuy nhiên, vùng đất này vẫn mang tính chất của diện mạo trung du với kiểu bậc thềm phù sa và bậc thang nhân tạo, thềm phù sa mới và bậc thềm pha tích (đất dốc tụ) với những đồi gò thoải, bát úp xen kẽ nhau chiếm 50% diện tích tự nhiên. Đặc điểm địa tầng Khu vực nghiên cứu thuộc hệ Jura thống dƣới – hệ tầng Hà Cối (J1hc) và hệ đệ tứ (Q), một phần nhỏ thuộc Hệ Trias thƣợng. - Hệ tầng Hà Cối, tuổi Jura, phụ thống dƣới (J1hc1). Thành phần hệ tầng là sạn kết, cát kết, bột kết. Trong đá cát bột kết, bột kết màu xám vàng chứa hoá đá thực vật: Czekandwskia rigida Heer, Equisetites sp. Tại các hố khoan sâu thấy phát hiện hệ tầng phân bố ở độ sâu 40-50m, phía trên mặt đá thƣờng bị phong Hàn Thị Thúy Hằng Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 120(06): 101 – 104 102 hóa thành sét lẫn dăm sạn, bề dầy phong hóa từ 5 -12m. - Hệ tầng Hà Cối, tuổi Jura, phụ thống trên (J1hc2) gồm cát kết hạt thô đến trung bình, bột kết, cát bột kết màu gụ, sét bột kết, sét kết chứa vôi. Đá sét chứa bột và chứa vôi gồm:Sericit từ 74-87%; Calcit từ 7-15%; Thạch anh từ 5-10%. Đá vôi, vôi sét gồm: Calcit từ 60-97%; sét từ 1-30%; thạch anh từ 2-15%. Đá silic-sét gồm: Silic từ 60-65%; Clorrit từ 34-39%. - Hệ đệ tứ (Q): Trầm tích aluvi, deluvi phân bố trên phạm vi khu vực nghiên cứu với chiều dày khá lớn trên các cánh đồng trũng có địa hình bằng phẳng. Thành phần gồm sét, sét pha phía trên và lớp cát hạt thô đến hạt trung phía dƣới. Các trầm tích sông hiện đại phân bố rất phức tạp, chiều dày biến đổi không có qui luật trong phạm vi nghiên cứu. - Hệ Trias thƣợng, điệp Văn Lãng (T3n-rvl): Phân bố ở phía tây thành phố gồm trầm tích chứa than, cuội kết, bột kết, đá vôi chứa các lớp kẹp sét. Phân chia cấu trúc nền Cấu trúc nền khu vực nghiên cứu đƣợc xác định theo quan điểm: Cấu trúc nền đƣợc hiểu là quan hệ sắp xếp không gian của các thể địa chất cấu tạo nền đất, số lƣợng, đặc điểm hình dạng, kích thƣớc, thành phần, trạng thái và tính chất của các yếu tố này (GS.TSKH. Phạm Văn Tỵ,1999) Tập hợp từ các báo cáo khảo sát ĐCCT có 250 hố khoan đã thu thập đƣợc từ [1,2,3,4] cho thấy mật độ các hố khoan tƣơng đối phủ khắp đều trên khu vực nghiên cứu. Chiều sâu hố khoan trung bình 25m, trong đó khoảng 120 hố khoan có độ sâu từ 10- 20m, 80 hố khoan có độ sâu từ 20 -30 m, 50 hố khoan có độ sâu 30 -50m. Độ sâu nghiên cứu của nền đƣợc bao phủ hết ảnh hƣởng của tải trọng công trình. Do đất nền phân lớp theo chiều sâu nên mô hình cấu trúc phân loại theo tính đồng nhất của mặt cắt đất nền. Nền đồng nhất đƣợc coi là nền đƣợc cấu tạo từ một lớp đất có bản chất ứng xử nhƣ nhau hoặc gần nhƣ nhau với độ chính xác chấp nhận đƣợc trong phạm vi hoạt động của tải trọng đang xét. Hình 1. Kết quả tập hợp sơ đồ vị trí lỗ khoan Dữ liệu lỗ khoan đƣợc cập nhật vào phần mềm Arcgis bao gồm: Cốt cao độ mặt lỗ khoan, cột địa tầng, chỉ tiêu cơ lý của từng lớp đất. Hình 2. Kết quả dữ liệu cột địa tầng mỗi lỗ khoan Căn cứ vào đặc điểm địa chất thủy văn, đặc tính địa chất công trình, đặc điểm địa hình- địa mạo- tân kiến tạo và qua phân tích dữ liệu các lỗ khoan của khu vực nghiên cứu, cấu trúc nền trong phạm vi độ sâu 30-50m đƣợc phân thành 3 kiểu cấu trúc nền đặc trƣng (Hình 3 a,b,c). Dấu hiệu để phân chia là sự tƣơng đồng cấu trúc của các lớp đất phủ trên mặt và nằm ngay dƣới. Kiểu I: Phân bố chủ yếu ở các xã phƣờng Phúc Xuân, Phúc Trìu, Tân Cƣơng, Tân Thành, Cam giá, Gia Sàng, Đồng Bẩm Cao Ngạn, Phan Đình Phùng và một phần Đồng Quang. Đây là khu vực trầm tích hệ đệ tứ Q phân bố trên phạm vi khu vực nghiên cứu với chiều dày khá lớn, thành phần gồm sét, sét pha phía trên và lớp cát hạt thô đến hạt trung, cuội sỏi phía dƣới. ub.p.h.v.t c«ng ty m«i tr-êng vµ c«ng tr×nh ®« thÞ l÷ ®oµn 575 b·i xØ cam gi¸ dèc nguy hiÓm ky èt x¨ng phó x¸ b-u ®iÖn phó x¸ ky èt x¨ng kim khÝ gang thÐp ky èt x¨ng tr-êng c.® luyÖn kim T©n Thµnh b-u ®iÖn nhµ kh¸ch gang thÐp tr-êng chu v¨n an ub ph-êng cam gi¸ UB p. trung thµnh Hè khoan ®Þa chÊt chó gi¶i: huyÖn phæ yªn bÖnh viÖn ®a khoa ka7 ka8 ka15 ka17 ka32 UB NghiÖp hå Th-¬ng kª n h N ói C è c b¹ch ®µn x· T©n Quang L÷ 382 S.V.§ §øc Hßa nhµ trÎ xãm C-êng C-¬ng L¨ng nói Dµi P.T.C.S TÝch L-¬ng Lµng Mon ThÞnh §øc P.T.C.S Phóc Hßa S. Kho H.T.X223a%248c73 Xu©n ThÞnh x· ThÞnh §øc §«ng Yªn §øc Hßa Hßa B¾c Phóc Hßa Phóc Tr×u KTT cÇu Trµ V-ên s«ng cÇu LuyÖn thÐp Lµng Lau L a H a A mi ¨ng X.N TÊm Lîp cÊp 2 Phó X¸ S g . cÇu Loµng Ph.Phó X¸ X.N.D vµ ®êi sèng X.N C«ng tr×nh kiÕn tróc Lµng Lau Cam Gi¸ Tr.cÊp 2 Lµng Nói Ph.Cam Gi¸ mÉu gi¸ o tr-êng P.X C«ng nghÖ sØ bÕn c¸t nhµ c¸n thÐp Cèc Ho¸ N.M lß cao khu lß cao l÷ 234 Tr. X¸ sØ bÕn ®ß sØ X.N VËn t¶i gang thÐp cæng bµn c©nt chî t¹m Khu T©y X.N bª t«ng TÝch L-¬ng cÇu L-u X¸ dÇu §.H C«ng nghiÖp LuyÖn kim mµu Cty. §éi I X. N §-êng S¾t Hµ Th¸i ga L-u X¸ X. N chÕ biÕn Gç xãm CÇu §á nhµ trÎ chî UBthùc lËp x-ëng Cty. XD? ? ? M? ? ? ? ? ? ? M67 N ó i Tiªn Sg . Tóc TiÕn Sè 3 tµi chÝnh së X - ¬ n g Su è i luyÖn quÆng x-ëng T.T chèng sÐt UB Gia Sµng N.M c¸n thÐp Rång cÇu X-¬ng H.T.X ®óc B¾c Nam Cty. Ch¨n nu«i Trg Bé Giao th«ng P.T©n Long bÕn O¸nh Xãm O¸nh d-ìng tØnh Tr¹m §iÒu UB Ph.Quang Trung X.N .X.D cÇu Hoµng V¨n Thô N.M giÊy Së §iÖn Lùc MÇm non chuyªn ban thanh niªn S.V.§ c¬ khÝ 3-2 ga Qu¸n TriÒu B x¨ng ThÇn V× ub p.Q.V V cÇu Má B¹ch X· Phóc Hµ ThÇn Kú B¹chsuèi Má ký tóc x¸ ®¹i häc n«ng nghiÖp 3 Lµng Um ga Qu¸n TriÒu muèi X.N ®òa Q.K 1 Ph.Quan TriÒu X.N Trén muèi Quang Vinh má than chî i ètX.N muèi C.ty ®iÖn lùc tr¹i giam X.N 10 chî t©n long U.B N.M Sø s« n g c Ç u miÒn nói s©n chî t.t©mn Quang Vinh Soi D©u s u è i B¹ch M á trung t©m y tÕ §.H S- ph¹m S.V.§ nghiÖp 2 C.ty th-¬ng nhµ trÎ Phó LiÔn Ph. Hoµng V¨n ThômiÒn nóiB.T v¨n hãa TØnh uû B¶o Tµng Qu©n Sù Cty T.V. Giao th«ng Tr-êng T.H. S- ph¹m B.V. T©m thÇn B.V. Y.H.C.T § - ê n g Q u a n g T r u n g Cty ViÖt B¾c N.Tr. LiÖt Sü U.B.N.D N.Tr. LiÖt SüTr-êng P.T.C.S X.N. LuyÖn Kim MÇu Ph.Quang Vinh Ph. T©n Long Ph. Gia Sµng Xãm §åi x· TÝch L-¬ng Ph.H-¬ng S¬n Ph. Ph n §×nh Phïng ® - ê n g c ¸ c h m ¹ n g th ¸ n g 8 h ®- ên g b ¾c na m Ph.Tr-ng V-¬ng § - ê n g p h a n § ×n h P h ï n g § - ê n g p h a n § ×n h P h ï n g § - ê n g M in h C Ç u §-ê ng Phñ LiÔu CÇu §¸n §-êng T©n ThÞnh § - ê n g N ó i C è c §-êng Nói Cèc §-ê ng Nói Cèc Khu gang thÐp Th¸i Nguyªn Ph. Tóc Duyªn Ph. ThÞnh §¸n S« n g cÇ u suèi loµng su è i l o µ n g su èi l- u x¸ s u è i l - u x ¸ s u è i v ã n g ù a b h u y Ön ® å n g h û §-êng B¾c C¹n CÇu gia bÈy § -ê n g § é i C Ên § - ê n g l - ¬ n g n g ä c q u y Õ n § -ê n g g iao tÕ C.A Thµnh phè ® - ê n g 3 -2 §-êng d-¬ng tù minh x· T©n C-¬ng hå nói cèc ®-êng t1-262 Chî Gia Sµng tra XD Nhµ m¸y n-íc §éi thanh chi côc thuÕ Z159 dù phßng ub P.P§P c«ng an cøu ho¶ tr-êng vïng cao bÖnh viÖn A S.T- ph¸p toµ ¸n tØnh x.n may minh cÇu tam gi¸c huyÖn phó l-¬ng huyÖn ®¹i tõ huyÖn phæ yªn h u y Ön p h ó b ×n hthÞ x· s«ng c«ng ng· ba ®-êng vµo má Z127 Söa ch÷a lµng Chµm TT. Cai nghiÖn 3 19 - 5 ViÖn má LuyÖn Kim X . N thùc nghiÖm Trg. P.T.C.S T©n ThÞnh K.T.T S.V.§ K.T.T N.M C¬ khÝ 19-5 Ph. T©n LËp s©n bãng Lµng L-ît Th«n Thanh ThÞnh §¸n C.Nh. kho b¹c Lµng CaoX.N 514 Q.Khu 1 Ph .T©n ThÞnh QuyÕt Th¾ng T©n §øc Hîp Thµnh X. Kh¸nh Hoµ Nh©n Hoµ C©y ThÞ Lµng Mon ViÖt B¾c T. H Kinh tÕ B.V Lao Hoµ HuyÖn S.X.V.L X©y dùng Giao th«ng I C. ty C«ng Tr×nh T.H Th-¬ng M¹i ( Bé G. N NÆng ) ga ra « t« C. ty Kim khÝ s¾t chî X . N. Thi c«ng C¬ giíi Ng« QuyÒn Trg . P.T.T.H Chi côc KiÓm L©m Lµng §¸n B.§ ThÞnh §¸n Chî (Nh©n Hßa) tr-êng xãm Chî tr-êng Gß Mãc Trung Thµnh Thuû Lîi C.ty X©y dùng D. T Qu©n ®éi V.t¶i MiÒn nói X· QuyÕt Th¾ng hÇm hÇm Z115 vIÖT b¾C chî Th¸i S¬n S¬n TiÕn D.T.Q.§ U.B C.ty X©y dùng sè 2 chî phó th¸i S©n Gß Mãc giÕng « t« Bé ChØ huy QS 3 X.N in Ph. §ång Quang B¾c Nam ng· ba Thuû-Bé B¾c Th¸i N.thuËt B¾c Th¸i §¹i häc Y r¹p C.bãng chî B.xe chî §ång Quang27ngc Yh s©n CÇu Tr¾ng (së C.N) C.Ty D©u t»m t¬ Së Thñy lîi C.ty Thñy s¶n Së giao th«ng UB UB p.t©n thµnh Phè H-¬ng Phóc Th¸i keo §åi Rõng B¾n Ba Cèng ng· ba Phè H-¬ng c¬ khÝ K.T.T §éc LËp X.N.V.L X©y dùng Trung L-¬ng Kªnh nói Cèc Hµo Thä T©n Thµnh H.T.X Mµnh cä X.LuyÖn kim bét m¬ ¤ L-¬ng §Þa chÊt 16 ®oµn Ph. T©n Thµnh Ph. Trung Thµnh P.T.T.H Gang thÐp Th¾ng Lîi r¹p h¸t Nga Thiªn hå B.V Gang thÐp S.V.§ chî Dèc Hanh §-êng Trßn ng· t- L.§ §Þa chÊt ®oµn 118 Gang thÐp nhµ V.H.C.N S.V.§ C.N Gang thÐp T.H Kü thuËt s©n b¹ch ®µn Xãm Cö S. Vã N gù a Xãi C¸ X· L-¬ng S¬n Xãm sai B×nh D©n B.V Gang thÐp T©n Thµnh T.H Vã Ngùa chî Tr¹m x¸ Thanh L-¬ng P. T. C. S §éc LËp P. T. C. Sc L K. T. T §åi F2 s©n B×nh Minh C«ng Tr×nh K. T. T MÉu Gi¸ o Tr-êng nhµ V¨n ho¸ K. T. T x· TÝch L-¬ng §.H C«ng nghiÖp x-ëng thùc lËp T©n Chung TiÕn Bé Xãm Ng©n Hoµng TiÕnBa Cèng 3 Hoµng Trªn C©y Sui Long Giang? ? ? ? ? ? ? M49c l UB Phóc Tr×u §ång Néi §ång L¹nh Rõng Chïa Nhµ Thê Hång Th¸i §éi CÊn x· Phóc Xu©n Lai Thµnh xãm CÇu xãm Hång Nam TiÕn Lµng Hµ §Ìo §¸ C©y ThÞ C©y ThÞ Xu©n Hoµ (La Lai) 6( 4) s á i ®ång bÈm ®ång bÈm h×nh trô hè khoan § é s © u T ª n lí p m Æ t c ¾ t (m ) C h iÒ u d µ y (m ) h è k h o a n mÉu ®é s©u lÊy thÝ nghiÖm Sè hiÖu & M« t¶ ®Êt ®¸ 30 40 50 Bóa / 15cm N3N2N1(m) §é s©u thÝ nghiÖm G i¸ t rÞ N 0 10 thÝ nghiÖm xuyªn tiªu chuÈn 20 biÓu ®å N = Bóa / 30cm SÐt pha mµu n©u vµng n©u ®á th¸i dÎo cøng, 5.52 5.1 11.05 4.0 kÑp sÐt pha xanh, tr¹ng th¸i cøng, kÕt cÊu chÆt U: MÉu Nguyªn d¹ng D: MÉu x¸o ®éng R: MÉu ®¸ (m ) M É u x ¸ o ® é n g S è h iÖ u SÐt pha lÉn d¨m s¹n bét kÕt mÇu n©u vµng x¸m nöa cøng, kÕt cÊu chÆt võa mµu x¸m n©u tr¹ng th¸i cøng, kÕt cÊu chÆt 7.03 1.5 16.06 5.0 SÐt pha mµu x¸m ®en x¸m n©u, dÎo cøng, kÕt cÊu chÆt võa 2.0-2.2 U1 2.2-2.65 4 5 5 11 6.0-6.2 U3 10.0-10.2 U5 18.0-18.2 R1 10.2-10.65 9 10 13 24 14.0-14.45 >50 18.2-18.65 >50 6.2-6.65 3 4 5 9 4.2-4.65 5 6 8 14 8.2-8.65 8 10 11 21 12.0-12.45 >50 16.0-16.45 >50 8.0-8.2 U4 4.0-4.2 U2 L2 25 x¸m n©u, tr¹ng kÕt cÊu chÆt võa ®«i chç yÕu phong hãa, xanh x¸m ®en, tr¹ng th¸i §¸ sÐt - bét kÕt phong hãa xen mµu n©u x¸m x¸m §¸ sÐt kÕt dËp vì nøt nÎ x¸m xanh, §Êt h÷u c¬ L: MÉu th¹ch häc